【作者】李梅 吴小波 李萌 吕聪 董旭杰 曹福祥

【机构】中南林业科技大学生命科学与技术学院 湖南省环境资源植物开发与利用工程技术研究中心

摘要：以漆酶活性为指标,利用不同果皮为基质对糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）固态发酵产漆酶的条件进行优化并对所产漆酶进行纯化,研究纯化后漆酶的酶学性质。结果表明:以柚皮为培养基质（5g柚皮、25mL水、20μL吐温-80）,30℃固态发酵10d,糙皮侧耳产漆酶的活性最高,比活力为21800U/g;在该条件下将糙皮侧耳所产漆酶的粗酶液用硫酸铵沉淀、透析、浓缩、DEAE-纤维离子交换柱层析得到漆酶蛋白单一条带,SDS-PAGE检测蛋白相对分子质量约66000;该漆酶命名为Lac h2,其最适反应温度为60℃,最适反应pH值为4.5;在30～50℃,pH 4.5～6.0范围内稳定;金属离子Zn2+、Mn2+、Cu2+和Mg2+对纯化的漆酶Lac h2的酶活力有促进作用而Ca2+、Ag+和Fe2+对Lac h2的酶活力有抑制作用。

基金：湖南省科技厅重点研发项目(2016NK2143)；

关键词：漆酶; 柚皮; 纯化; 酶学性质;