【作者】章先 方云 付子贤 周一钊 方维焕 宋厚辉

【机构】浙江农林大学动物科技学院中澳动物健康大数据分析联合实验室动物健康检测互联网技术浙江省工程实验室浙江大学动物科学学院浙江省检验检疫科学技术研究院

摘要：黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）在自然界普遍存在,可污染多种粮食作物和饲料,给动物和人类健康造成严重威胁。为建立AFB1高灵敏度的快速检测方法,本研究通过采用纳米金颗粒（Au nanoparticles,AuNPs）和辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）双标记AFB1单克隆抗体,建立新型酶联免疫检测方法（HRP-AuNPs IC-ELISA）,检测下限（IC10）为0.017ng/mL,检测区间(IC20–IC80)为0.026–0.376ng/mL,半数抑制率(IC50)为0.099ng/mL,与黄曲霉毒素B2、G1、G2和M1的交叉反应率分别为2.7%、9.3%、2.1%和5.3%,与赭曲霉毒素A、伏马毒素B1、桔青霉素、展青霉毒素和玉米赤霉烯酮几乎不存在交叉反应。在玉米和面粉样本中的加标回收率可达88.93–103.55%,与LC-MS/MS同时对天然样本中AFB1含量进行检测,结果表明,两种方法相关性良好。本研究建立的HRP-AuNPs IC-ELISA耗时短且灵敏度高,可用于实际样本中AFB1的快速定量检测与分析,也为其他霉菌毒素的精准检测技术开发提供参考。

基金：浙江省自然科学基金(LQ17C170002)； 浙江农林大学人才项目(2016FR025)； 浙江省重点研发计划(2018C02041)； 国家高新技术研究发展计划(863计划)(2012AA101602)~~；

关键词：黄曲霉毒素B1; 纳米金颗粒; 辣根过氧化物酶; 单克隆抗体;