【作者】彭轶楠王沛雅巩晓芳祝英杨晖王治业周剑平

【机构】甘肃省科学院生物研究所甘肃省微生物资源开发利用重点实验室甘肃省科学院自然能源研究所

摘要：寡雄腐霉Pythium oligandrum是一种对动、植物和环境无害,兼具杀菌和增产效果的生防真菌。本研究以0.8mol/L甘露醇与25mmol/L CaCl2和10mmol/L Tris-HCl作为渗透压稳定剂,使寡雄腐霉菌丝体在含有裂解酶、纤维素酶、破壁酶的复合酶系中酶解得到其原生质体。此原生质体通过液体振荡培养的途径恢复再生1d后涂于平板上可生长为成熟菌体。本研究所述方法制备得到的寡雄腐霉原生质体数量超过1×109CFU/m L,活性超过80%;通过液体培养再生途径使得寡雄腐霉原生质体再生率达32.9%。此方法操作简便,稳定性好,获得的寡雄腐霉原生质体品质高、数量多,完全能够满足后期基因遗传转化、细胞融合培养等研究应用。

基金：国家国际合作专项项目(2013DFA30950)； 甘肃省基础研究创新群体计划(1606RJIA325)； 甘肃省科学院创新团队(CX201601)； 甘肃省软科学研究计划(1205ZCRA170)~~；

关键词：寡雄腐霉; 生防真菌; 原生质体; 制备及再生;