【作者】马超君 王刚正 周莎莎 罗义 龚钰华 边银丙

【机构】华中农业大学植物科学技术学院应用真菌研究所

摘要：邻氨基苯甲酸合酶(Trp E)是生物体内一种重要的逆境诱导蛋白,其在逆境条件下的响应保证了生物体生存相关产物的正常代谢。本文以香菇Lentinula edodes栽培菌株S606为试验材料,以Le Trp E功能结构保守区域395bp的反向互补片段为干扰片段,构建Letrp E基因双向启动子RNAi载体;采用根癌农杆菌介导转化法侵染香菇菌丝,通过PCR方法检测DNA插入片段,获得11个阳性转化子;实时荧光定量PCR分析结果表明,2个转化子Letrp E基因表达量较野生型菌株下调了2–3倍,确认其为Letrp E基因RNAi转化子;菌丝体在40℃高温处理24h后,检查到吲哚-3-乙酸合成途径中基因Le Tam-1在野生菌株S606表达量上调,而在2个RNAi转化子中表达量下调;RNAi转化子菌丝体在25℃下不能恢复生长,而野生型菌丝体可以恢复生长。研究表明,香菇Letrp E基因的功能与耐热性有关。

基金：国家自然科学基金(34116162)； 湖北省技术创新专项重大项目(2016ABA100)~~；

关键词：香菇; 高温胁迫; 耐热性; 邻氨基苯甲酸合酶; 转化子;