【作者】张国庆 王有志 王守现 王贺祥 陈青君
【机构】北京农学院农业部都市农业(北方)重点实验室 中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室 中国科学院微生物研究所菌种保藏中心 北京市农林科学院植物保护环境保护研究所
摘要：树状多节孢Nodulisporium sylviforme是从东北红豆杉Taxus cuspidata分离、可产生紫杉醇的内生真菌。研究以树状多节孢为材料,利用液体发酵手段获得菌丝体,通过CM-cellulose阴离子交换柱层析、Q-Sepharose阳离子交换柱层析和FPLC凝胶过滤层析(Superdex 75),获得纯化的树状多节孢酸性磷酸酶蛋白(Nod-ACP)。结合FPLC和SDS-PAGE分析,判定该磷酸酶为分子量44kDa单亚基蛋白。酶学性质研究表明,其最适pH值为3.0,最适温度为58℃。6.25-50mmol/L的Ca2+、Mn2+、Mg2+和Zn2+对酶活有30%-50%的促进作用,而Cu2+、Al3+和Fe3+对酶活有显著的抑制作用;当Fe2+浓度低于25mmol/L时表现为促进作用,但浓度达到50mmol/L时磷酸酶完全失活。
基金：北京市科委项目(No.Z101105002510003)； 北京市属高等学校人才强教项目(No.PHR200907136)；
关键词：树状多节孢; 酸性磷酸酶; 性质; 酶活性;