【作者】张永军方卫国金凯罗志兵周永洪肖月华裴炎

【机构】农业部生物技术与作物品质改良重点实验室重庆市农业生物技术重点实验室西南农业大学生物技术中心农业部生物技术与作物品质改良重点实验室重庆市农业生物技术重点实验室西南农业大学生物技术中心 重庆400716

【摘要】根据几种丝状真菌FUS3/KSS1类MAPK的保守序列设计简并引物,从昆虫病原真菌球孢白僵菌中扩增出MAPK基因的部分片段,进而利用YADE法延伸该片段的上、下游邻接序列,获得MAPK基因的全长序列,命名为BbMPK1。用3′RACE扩增出BbMPK1的全长cDNA序列,该序列含有一个1071bp的ORF,编码356个氨基酸的多肽,推测分子量为41.2kDa,等电点为6.61。BbMPK1含有11个MAPK共有的蛋白激酶区域和1个MAPK激酶作用的磷酸化位点区域(TEY),其氨基酸序列与丝状真菌的TMKA、PMK1、CMK1、FMK1和BMP1等MAPK高度同源。系统聚类结果表明,BbMPK1属于酵母FUS3/KSS1类MAPK。Southern杂交表明,BbMPK1在球孢白僵菌基因组中以单拷贝形式存在。RT-PCR分析表明BbMPK1在分生孢子休眠阶段、萌发阶段和菌丝生长时期均表达。研究结果为阐明酵母FUS3/KSS1类MAPK同源基因在球孢白僵菌中的作用奠定了基础。

【基金】国家重点基础研究计划(973)项目(2003CB114203)； 国家高技术研究发展计划(863)项目(2002AA214051)； 重庆市教委项目(20204)；

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