柱状田头菇凝集素的分离纯化及其部分性质
The Isolation-Purification and Some Characteristics of Agrocybe cylindracea Lectin
刘艳如 余萍 郑怡
摘 要：经硫酸铵分级沉淀、活性炭柱吸附、DEAE-Sepharose FF离子交换层析及Sephadex G-100分子筛层析,从柱状田头菇子实体浸出液中分离到在PAGE上显示1条蛋白质染色带的凝集素ACL(Agrocybe cylindracea lectin).经Sephadex G-100测得ACL分子量为67890,经SDS-PAGE测定,其亚基分子量分别为34673、20000和13183.ACL的中性糖含量为5.87%,氨基酸中天冬氨酸含量最高,半胱氨酸含量最低.ACL能凝集多种动物和人的A、B或O型红细胞,对鼠红细胞的血凝活性可被7种单糖和3种双糖抑制.ACL是一种对热较为稳定的凝集素.
关键词：柱状田头菇; 凝集素; 提纯; 血球凝集活性; 理化特性
分类号：S646.901 文献标识码：A
文章编号：1005-9873(2004)03-0017-07
基金项目：福建省教育厅资助项目"食用菌凝集素的研究及应用"(JA02185)的部分内容
作者简介：刘艳如(1964-),女,1986年毕业于华东师范大学化学系,理学学士,副教授,主要从事蛋白质的分离、纯化等研究,发表主笔论文9篇.
作者单位：刘艳如（福建师范大学生物工程学院）
余萍（福建师范大学化学与材料学院,福州,350007）
郑怡（福建师范大学生物工程学院）
参考文献：
［1］Peumans WJ, Van Damme JEM. Lectins as plant defense protein[J]. Plant Physiol, 1995, 109:347～352.
［2］Liener IE. Phytohemagglutinins (phygolectins)[J]. Ann Rev physiol, 1997, 27 : 291～319.
［3］陈慧黎, 王克夷. 糖复合物的结构和功能[M]. 上海:上海医科大学出版社, 1997. 301～332.
［4］Wang HX, Bun TN, Ooi VEC. Lectins from mushroom[J]. Mycol Res, 1998, 102 (8): 897～906.
［5］Yu LG, Fernig DJ, Smith JA, et al. Reversible inhibition of proliferation of epithelial cell lines by Agaricus bisporus (edible mushroom) lectin[J]. Cancer Res, 1993, 53: 4627～4632.
［6］Ko L, Hsu CI, Lin TH, et al. A new fungal immunomodulatory protein, FIP-fve isolated from the edible mushroom, Flammulina velutipes and its complete amino acid sequence[J]. Eur J Biochem, 1995, 228:244～249.
［7］Haak FM, Kino K, Sone T, et al. Ling Zhi-8: A novel T cell mitogen induces cytoking production and upregulation of ICAM-1 expression[J]. Cell Immunol, 1993, 150: 101～113.
［8］Van-Der-Ham LG, Van-Der-Vliet JA, Bocken CFM, et al. Studies on a new immunomodulating agent[J]. Transplantation(Baltimore), 1995, 60: 438～443.
［9］Wang HX, Ng TB, Ooi VEC, et al. Actions of lectins from the mushroon Tricholoma mongolicum on macrophags, splenocytes and life-span in sarcoma-bearing mice[J]. Anticancer Res, 1997, 18: 419～424.
［10］张飞翔. 中华神菇-柱壮田头菇(茶薪菇)制种手机版体育[J]. 适用技术之窗, 1999, (4):20～21.
［11］赵永芳. 生物化学技术原理及其应用[M]. 武汉:武汉大学出版社, 1994. 192～194.
［12］李建成, 萧能赓, 余瑞元,等. 生物化学实验原理和方法[M]. 北京:北京大学出版社, 1994. 174～176, 204～206.
［13］Dubois M, Gilles KA, Hamiltion JK, et al. Colorimetric method for determination of sugars and related substance[J]. Anal Chem, 1957, 28: 350～356.
［14］孙册, 朱政, 莫汉庆. 凝集素[M]. 北京: 科学出版社, 1986. 20, 63.
［15］施炜星, 孙册. 红花菜豆凝集素的生物学作用[J]. 生物化学杂志, 1995, 11(5):567～572.
［16］施佳军, 赵呈裕, 曾仲奎. 鸡土从凝集素的分离纯化与性质研究[J]. 天然产物研究与开发, 1998,10(1):20～24.
［17］Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacterio-phage T4[J]. Nature, 1970, 227: 680～686.
