原种和栽培种的制备
试管母种一般都不能直接用作栽培接种，而要经过移植驯化，使其适应栽培条件后方可采用。通常母种分离出来后，要移植到相适应的原种培养基中进行驯化，一般每支母种可移接原种6～8瓶。它虽然可以用于栽培播种，但数量太少，不经济，还要采用同样的方法将原种扩接培养成栽培种，才能满足生产上的需要，一般每瓶原种可扩接栽培种70～80瓶。 具体制备方法如下：
（一）原种和栽培种培养基的配制
1.培养基的种类 凡木生的食用菌可用木屑——米糠培养基；凡草生的食用菌可用稻草或粪草培养基。
（l） 木屑一米糠培养基（适于香菇、银耳、黑木耳、猴头、平菇等）
杂木屑 78％ 米糠或麦皮 20％
蔗糖 10％ 石膏粉 l％
制法是先将蔗糖溶于清水中，然后和杂木屑、米糠（或麦皮）等材料拌和。培养基的含水量以60％～65％为宜，加水量随木屑种类而异，一般每百斤干料加水120～150斤，以手紧握培养基，指间有水泌出而又不下滴为度。培养基配好后，装入菌种瓶中，用尖形木棒在培养基中钻一直通瓶底的洞孔，使灭菌更彻底，也有利于菌丝的蔓延。瓶内外洗净后，擦干，塞上棉塞，瓶口用牛皮纸包扎紧。
（2） 粪草培养基（适于培养蘑菇菌种）
粪草 95％ 麦皮 3％
蔗糖 1％ 石膏纷 1％
制法是先将粪草堆积发酵，粪草比5：5，发酵时间18～20天，翻堆2～3次，晒干，切碎，装瓶。
（3） 稻草培养基（适于草菇、平菇、凤尾菇等）
稻草 80％ 米糠或麦皮 18％
蔗糖 1％ 石膏粉 1％
制法是先将稻草切成1厘米长的小段，用水浸湿，堆制1～2天，待稻草吸水软化后，拌入18％米糠（或麦皮）以及蔗糖和石膏粉，培养基含水量达65％；然后装瓶。
（4） 种木培养基（适于香菇、银耳、黑木耳等木生食用菌 段木接种）
种木 70％ 木屑 10％
米糠 18% 蔗糖 1％
石膏粉 1％
制法是先将种木（有圆形种木和楔形种木两种）在清水中浸一夜，待种木充分吸水后，再拌入木屑和米糠等，然后装瓶。
（5） 麦粒培养基（适于蘑菇、猴头、凤尾菇等）
麦粒 80％ 木屑 18％
蔗糖 1％ 石膏粉 1％
制法是先将麦粒洗净，浸泡一夜吸水膨胀后，置锅中煮沸半小时，至熟而不烂，捞起滤去多余的水，加入其它配料混拌均匀。调节好适宜的酸碱度，含水量为60％～65％，然后逐一分装菌种瓶巾，边装边压实，装至瓶高1/2或3/5处压平（应在表面铺一层木屑后压平），中间扎一圆洞，洗净瓶壁和瓶口，用布擦干，塞上棉花，并用牛皮纸包扎好瓶口。
2.培养基灭菌 培养基配制好后，即可进行高压或常压蒸汽灭菌。
（1）常压灭菌 利用蒸笼或土消毒灶灭菌，设备比较简单，适合农村群众生产，但一次不宜过多，一般1000瓶左右为好。灭菌时间待锅内蒸汽上升后，保持6～8小时，却出冷即后就可接种。
（2）高压灭菌 利用高压锅产生的蒸汽压进行杀菌。具体操作，把料瓶装火锅内，加热至压力达到0.5公斤／厘米2 时，放出冷气，使压力回到零，关好阀门，继续加热使压力上升到1.5公斤／厘米2 时，保持1.5～2小时，然后徐徐放出蒸汽，压力回到零后，打开锅盖取出料瓶。
（二）接种、培养
培养基经配制和灭菌后，便可进行接种。为避免接种过程中污染杂菌，接种工作要在无菌室或接种箱中进行。无菌室的体积要求不宜过大，一般6～8立方米，能供一、二人操作即可。室内装有紫外线杀菌灯，门窗关闭后里面的空气能与外界隔绝，经消毒就能造成无菌条件。若没有无菌室也可用洁净的小房间代替，但必须进行严格的消毒灭菌。接种箱是代替无菌室的密闭透明小箱。具有体积小，简单轻便，消毒彻底等优点。一般长100厘米，宽60厘米，高50～60厘米，顶部向两边倾斜，安装透明玻璃。箱里装有紫外线杀菌灯，或用福尔马林和高锰酸钾混合熏蒸灭菌，人在箱外，只用两只手伸入箱内进行接种操作，效果好，成功率高。
无菌室和接种箱的灭菌方法，常用的有下列几种：
1.紫外灯灭菌 用于空气中灭菌，30瓦紫外灯距桌面1米照射15分钟或30分钟。
2.化学药品灭菌 所用化学药品的种类甚多，主要的是：
（1）70％酒精 用于接种针以及接种人员的手和玻璃器具的表面杀菌。
（2）5％石碳酸 用于空间喷雾灭菌。
（3）0.1％升汞水 用于分离材料的表面消毒。
（4）甲醛溶液 用于空间熏蒸灭菌，可将福尔马林放在瓷器中，直接加热使其蒸发，或于容器中先加入高锰酸钾，其用量为福尔马林重量的10％以上，然后倒入福尔马林，使其蒸发，一般每一立方米体积用10毫升福尔马林即可。
3.火焰灭菌 用于接种针或其他金属用具的灭菌，可直接在酒精灯火焰上烧红。此外，在接种过程中，将试管口，菌种瓶口等采用通过火焰的方式也可达到灭菌的目的。
培养基经灭菌之后，在无菌室或接种箱中，用接种针在酒精灯火焰上，迅速从试管母种中挑一小块带有培养基的菌丝体，放在瓶内的培养基上即成原种。接种后的原种应放在培养室中培养，培养室的大小要适当，过大保温比较困难。四周墙壁用砖砌，石灰粉刷，地面铺水泥，设有通气窗，最好有调温调湿装置，并严格做好消毒灭菌。温度保持在23～26℃之间，培养一个月左右，待菌丝长满全瓶后，即可用来接栽培种。
栽培种的培养基其配制方法和灭菌等大致与原种相同，但装瓶应满些，至瓶肩处为宜。一般每瓶原种可转接栽培种60～80瓶。
