草菇耐低温菌株的诱变选育与鉴定
SELECTION FOR COLD-RESISTENT STRAIN BY COMPLEX MUTAGENESIS OF VOLVARIELLA VOLVACEA AND IDENTIFICATION OF THE STRAIN
韩业君 曹晖 陈明杰 潘迎捷
摘 要：在草菇V23原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体.分别用紫外线(UV),60Co-γ射线,硫酸二乙酯(DES)对原生质体进行复合诱变.初筛、复筛获得耐常规低温(4℃)10d的菌株VH.栽培实验证明:VH在26℃下的生物学效率明显优于V23(CK),且差异极显著.同工酶分析表明:VH过氧化物同工酶,酯酶同工酶谱带数量及酶活性均发生变化;RAPD实验显示:VH相对于V23的变异系数为0.213.VH菇体正常,味道鲜美,食用后无毒副作用.氨基酸组成分析表明:除总氨基酸和谷氨酸含量VH高于V23外,其它氨基酸差异不明显.VH遗传性状稳定,是具有潜在应用价值的优良菌株.
关键词：原生质体,同工酶分析,氨基酸
分类号：Q939.96 文献标识码：A
文章编号：1672-6472(2004)03-0417-0422
基金项目：上海市农委科技兴农重点项目资助(农科攻字(98)第01-14号)
作者简介：陈明杰,通讯作者:[email protected]
作者单位：韩业君（南京农业大学生命科学学院微生物系,南京,210095;农业部食用菌遗传育种重点开放实验室,上海市农业遗传育种重点实验室;上海市农业科学院食用菌研究所,上海,201106）
曹晖（农业部食用菌遗传育种重点开放实验室,上海市农业遗传育种重点实验室;上海市农业科学院食用菌研究所,上海,201106）
陈明杰（农业部食用菌遗传育种重点开放实验室,上海市农业遗传育种重点实验室;上海市农业科学院食用菌研究所,上海,201106）
潘迎捷（农业部食用菌遗传育种重点开放实验室,上海市农业遗传育种重点实验室;上海市农业科学院食用菌研究所,上海,201106）
参考文献：
［1］Chang ST, Hayes WA, 1978. The biology and cultivation of edible mushroom. New York:Academia Press, 573～605
［2］Chang ST, Buswell JA, Chiu SW, 1993. Mushroom biology and mushroom products. Hong Kong: The Chinese University Press,71 ～83
［3］Chang ST, Yau CK, 1971. Volvariella volvocea and its life history. American. Journal of Botany, 58:552～561
［4］Sanchez S, Demain A L, 1977. Enrich of autrophic mutants in Hansenulapolymorpha.European JAppl Microbiol, 4:45～49
［5］Guo LQ, Chen SC, 2001. Research advances in genetic transformation of edible fungi. Acta Edulis Fungi , 23 (7): 97～100 (in Chinese)
［6］Anon. (edited by Institute of Edible Fungi, Shanghai Academy of Agricultural Sciences), 1981. The Handbook of Edible Fungi Cultivation. Shanghai: Edulis Fungi Press. 1～462 (in Chinese)
［7］Wang MY, Chen M J, 2002. Isolation and purification of cold shock protein in Volvariella volvocea. Journal of Agriculture Biotechnology, 10 (2): 194～196 (in Chinese)
［8］Niu MY, Zhao ML, 1992. Experimental Technology of Cellular Biology. Beijing: Beijing Normal Univercity Press. 141～145 (in Chinese)
［9］Ge D, 2002. Isolation and identification of cold shock gene in Volvariella volvocea. Dissertation for MS degree, Liaoning Normal Univercity. 1～66 (in Chinese)
［10］Pan YJ, Ma AM, 1995. Study on homokaryotic protoplast breeding technique in Agaricus bisporus. Acta Edulis Fungi, 2 (4):11～17 (in Chinese)
［11］Hu NS, 1985. Isoenzyme Technology and Application. Changsha :Hunan Science and Technology Press. 1～365 (in Chinese)
［12］Bai LY, Ma YZ, 1996. The effects of low-dose 60Co- γ rays irradiation on some enzyme activities and isoenzyme zymogram in par-chio seedlings. Acta Agriculturae Nucleatae Sinica, 10 (1): 21～24 (in Chinese)
［13］上海农业科学院食用菌所,1981食用菌栽培手册.上海:<�食用菌>编辑部出版1～462
［14］郭丽琼林俊芳,2001.THP基因的重新克隆及草菇表达载体的构建.食用菌学报,23(7):97～100
［15］王美艳,陈明杰,2002.草菇低温诱导蛋白的分离与纯化.农业生物技术,10(2):194-196
［16］牛敏英,赵孟莲,1992.细胞生物学实验方法与技术.北京:北京北京市师范大学出版社.1～328
［17］葛丹,2002.草菇低温诱导基因的分离与鉴定.辽宁师范大学硕士学位论文.1～66
［18］潘迎捷,马爱民,1995.双孢蘑菇同核原生质体育种技术研究.食用菌学报,2(3):1～5
［19］胡能书,1985.同工酶技术及其应用.长沙:湖南科学技术出版社.1～365
［20］白玲玉,马玉珠,1996.低剂量60Co-γ射线辐照对白菜苗期酶活性及同工酶的影响.核农学报,10(1):21～24
菌物学报
MYCOSYSTEMA
2004 Vol.23 No.3 P.417-422
